我州林科所“中藏藥-甘松”項(xiàng)目基于四川農(nóng)業(yè)大學(xué)分子實(shí)驗(yàn)室,經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn)探索,初步建成甘松組織培養(yǎng)無菌體系,為后期甘松增殖培養(yǎng)與生根培養(yǎng)奠定了基礎(chǔ),也標(biāo)志著甘松組織培養(yǎng)工作取得階段性成果。
甘松組織培養(yǎng)無菌體系建立的重點(diǎn)在于甘松外植體部位的選定。前期實(shí)驗(yàn)分別選用了甘松的根(根芽、根芽莖、根莖),莖(莖基、莖段)及芽進(jìn)行組織培養(yǎng),結(jié)果表明甘松莖基的萌發(fā)率最高,因此選用甘松莖基作為外植體。將外植體切段放入45℃溫水吐溫10分鐘,再用流水沖洗1小時(shí);然后將沖洗好的外植體置于超凈臺(tái)上用無菌水沖洗1次,再用75%酒精浸泡15秒,之后用0.1%升汞溶液浸泡8~10 分鐘;接著用無菌水沖洗1次后接種到空白MS培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。
項(xiàng)目組將用接種成活的甘松組培苗進(jìn)行增殖培養(yǎng),即以MS培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基,將生長(zhǎng)健壯的組培苗從莖基部切取,重新接種到新的培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng),當(dāng)材料增殖到一定數(shù)量后,再進(jìn)行生根培養(yǎng)。
甘松組織培養(yǎng)是甘松繁育體系中的重要內(nèi)容,通過“中藏藥-甘松”項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)研究,掌握組織技術(shù)后,將呈現(xiàn)兩方面效益:一是組織培養(yǎng)利用植株個(gè)體進(jìn)行無性繁殖可避免大量采集草本植物甘松種子難度大的制約;二是此項(xiàng)研究相對(duì)傳統(tǒng)的種子繁殖,可加快繁殖效率,保護(hù)生態(tài)環(huán)境,拓寬中藏藥產(chǎn)業(yè)化發(fā)展中的種苗供應(yīng)途徑。